Objętość przefiltrowanej wody do każdej próbówki dodajemy 5 ml acetonu (90%)



Pobieranie 8.29 Kb.
Data30.04.2016
Rozmiar8.29 Kb.
OZNACZANIE chlorofili i feopigmentow


  • odfiltrowaną na sączkach GF/C lub GF/F zawiesinę umieszczamy w próbówkach szklanych

  • WAŻNE – zapisać objętość przefiltrowanej wody

  • do każdej próbówki dodajemy 5 ml acetonu (90%), delikatnie ucieramy sączek (szklaną bagietką), zamykamy korkiem

  • po 4 godz. ekstrakcji wirujemy próbki (10 min, 3500 obr./min)

  • klarowne próbki przenosimy kolejno do kuwety szklanej (1cm) i oznaczamy przy 4 długościach fal (750nm, 665nm, 647nm, 630nm)

  • do kuwety z próbką dodajemy 0,1 ml (kropla) 0,1M kwasu solnego, odczekujemy 1 min. i oznaczamy ponownie przy dwóch długościach fal 750nm oraz 665nm


UWAGI:

Wyliczenie stężenia chlorofilu a (chl a), chlorofilu b (chl b), chlorofilu c (chl c) oraz feofityny (feo) odbywa sie w oparciu o wzory empiryczne.


Ca = 11,85 (Abs665 – Abs750) – 1,54 (Abs647 – Abs750) – 0,08 (Abs630 – Abs750)

Cb = 21,03 (Abs647 – Abs750) – 5,43 (Abs665 – Abs750) – 2,66 (Abs630 – Abs750)

Cc = 24,52 (Abs630 – Abs750) – 1,67 (Abs665 – Abs750) – 7,60 (Abs647 – Abs750)

W poniższych wzorach:

a – wartość absorbancji po zakwaszeniu HCl

o- wartość absorbancji przed zakwaszeniem HCl


Cżywy=26,7((Abs665o – Abs750o) – (Abs665a – Abs750a))

Cfeofityna =26,7 (1,7 (Abs665a – Abs750a) – (Abs665o – Abs750o))




gdzie:

C Chl [mg/m3]

v – objętość acetonu [cm3],

V – objętość przefiltrowanego roztworu [dm3],

l – długość kuwety [cm].

Na przykład:









©absta.pl 2019
wyślij wiadomość

    Strona główna